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MAT1 correlates with molecular subtypes and predicts poor survival in breast cancer 认领 引用 被引量:3
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作者 Hanxiao Xu Xianguang Bai +3 位作者 Shengnan Yu Qian Liu Richard G Pestell Kongming Wu 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2018年第3期351-363,共13页
Objective:Menage a trois 1(MAT1)is a targeting subunit of cyclin-dependent kinase-activating kinase and general transcription factor IIH kinase,which modulates cell cycle,transcription and DNA repair.Its dysregulat... Objective:Menage a trois 1(MAT1)is a targeting subunit of cyclin-dependent kinase-activating kinase and general transcription factor IIH kinase,which modulates cell cycle,transcription and DNA repair.Its dysregulation is responsible for diseases including cancers.To further explore the role of MAT1 in breast cancer,we investigated the pathways in which MAT1 might be involved,the association between MAT1 and molecular subtypes,and the role of MAT1 in clinical outcomes of breast cancer patients.Methods:We conducted immunohistochemistry staining on tissue microarray and immunofluorescence staining on sections of MAT1 stable breast cancer cells.Also,we performed Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes pathway analysis,correlation analysis and prognosis analysis on public databases.Results:MAT1 was involved in multiple pathways including normal physiology signaling and disease-related signaling.Furthermore,MAT1 positively correlated with the protein status of estrogen receptor and progesterone receptor,and was enriched in luminal-type and human epidermal growth factor receptor 2-enriched breast cancer in comparison with basal-like subtype at both m RNA and protein levels.Correlation analysis revealed significant association between MAT1 m RNA amount and epithelial markers,mesenchymal markers,cancer stem cell markers,apoptosis markers,transcription markers and oncogenes.Consistently,the results of immunofluorescence stain indicated that MAT1 overexpression enhanced the protein abundance of epidermal growth factor receptor,vimentin,sex determining region Y-box 2 and sine oculis homeobox homolog 1.Importantly,Kaplan-Meier Plotter analysis reflected that MAT1 could serve as a prognostic biomarker predicting worse relapse-free survival and metastasis-free survival.Conclusions:MAT1 is correlated with molecular subtypes and is associated with unfavorable prognosis for breast cancer patients. 展开更多
关键词 Menage a trois 1(MAT1) breast cancer molecular subtypes prognosis proliferation
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核盘菌交配型基因mat1-1敲除载体的构建及转化 认领 引用 被引量:2
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作者 安乐 赵文生 +3 位作者 张世宏 刘金亮 彭友良 潘洪玉 《吉林大学学报(理学版)》 CAS 北大核心 2010年第1期140-145,共6页
利用根癌农杆菌介导真菌遗传转化方法对核盘菌的交配型基因mat1-1进行基因同源重组的敲除对比实验,获得了缺失mat1-1基因的转化菌株.先利用PCR方法获得mat1-1基因的左右两侧片段,将测序正确的两个侧翼片段分别重组到农杆菌转化载体PBI-... 利用根癌农杆菌介导真菌遗传转化方法对核盘菌的交配型基因mat1-1进行基因同源重组的敲除对比实验,获得了缺失mat1-1基因的转化菌株.先利用PCR方法获得mat1-1基因的左右两侧片段,将测序正确的两个侧翼片段分别重组到农杆菌转化载体PBI-G3C中,并将新霉素抗性标记引入农杆菌转化载体PBI-G3C中,构建成农杆菌介导转化核盘菌的打靶载体ΔPBI-G3CN-mat1-1,再将ΔPBI-G3CN-mat1-1质粒转化至根癌农杆菌EHA105中.利用核盘菌菌丝进行转化,将得到的转化菌株,利用PCR方法进行验证,证实有敲除菌株存在.通过对敲除菌株进行生理表型的测定发现,缺失mat1-1基因的敲除菌株其生长速度与野生核盘菌菌株相比无明显差异,但敲除菌株不能产生菌核与子囊盘. 展开更多
关键词 核盘菌 mat1-1基因 敲除载体 遗传转化
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冠突曲霉UBC与MAT1-2-1互作关系验证及功能研究 认领 引用
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作者 张胜花 费正林 +3 位作者 杨胡艳 孙冰 张锐 葛永怡 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1573-1582,共10页
【目的】验证冠突曲霉泛素结合酶(UBC)与交配型蛋白(MAT1-2-1)的互作关系,对UBC基因进行功能研究,为深入解析冠突曲霉有性产孢机制提供理论参考。【方法】采用实时荧光定量PCR检测UBC基因在冠突曲霉有性发育阶段的表达水平,酵母双杂交... 【目的】验证冠突曲霉泛素结合酶(UBC)与交配型蛋白(MAT1-2-1)的互作关系,对UBC基因进行功能研究,为深入解析冠突曲霉有性产孢机制提供理论参考。【方法】采用实时荧光定量PCR检测UBC基因在冠突曲霉有性发育阶段的表达水平,酵母双杂交试验验证MAT1-2-1与UBC的互作关系,利用无缝克隆方法构建pDHt/sk-hyg-UBC过表达载体,并转化冠突曲霉获得UBC过表达菌株,对过表达菌株进行表达量检测、形态学观察及氧和盐胁迫的耐受性测定。【结果】PCR克隆获得UBC基因的编码区(CDS)序列,长度为474 bp,编码157个氨基酸残基,相对分子质量为39587.24 Da,理论等电点为5.16,为疏水的不稳定蛋白,含跨膜结构域,定位于细胞核,属于UBCc超家族成员。有性发育阶段(闭囊壳形成期和子囊孢子大量形成期)UBC基因的相对表达量显著高于营养菌丝体阶段(P<0.05,下同)。自激活检测结果显示,UBC无自激活作用;酵母双杂交验证结果显示,UBC与MAT1-2-1存在互作关系。通过构建过表达载体pDHt/sk-hyg-UBC成功获得UBC过表达菌株(OE::UBC)。与野生型菌株相比,UBC和MAT1-2-1基因在UBC过表达菌株的相对表达量均显著升高。UBC过表达菌株与野生型菌株在MYA、MYA+5%NaCl和MYA+17%NaCl固体培养基上的菌落形态无明显差异。过表达菌株能分别在含18 mmol/L过氧化氢和25%NaCl的培养基中生长,而野生型菌株不能生长,说明UBC基因的过表达提高冠突曲霉对氧胁迫和盐胁迫的耐受性。【结论】UBC基因可能与冠突曲霉的有性发育相关,且与MAT1-2-1基因存在共表达特征。由于UBC与MAT1-2-1存在互作关系,且UBC基因的过表达可明显增强冠突曲霉的抗氧化和抗盐能力,故推测UBC通过与MAT1-2-1发生互作共同参与冠突曲霉的氧胁迫和盐胁迫应答过程。 展开更多
关键词 冠突曲霉 MAT1-2-1 UBC 酵母双杂交 过表达
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蛹虫草交配型对黄豆粉氮源液体发酵产物活性成分的影响 认领 引用 被引量:3
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作者 丁梦琪 王伟 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2025年第8期182-189,共8页
蛹虫草Cordyceps militaris作为冬虫夏草的重要替代品,其交配型(MAT1-1和MAT1-2)对其次级代谢产物的合成具有潜在调控能力,但具体影响尚不明确。本研究通过单孢分离和PCR扩增技术鉴定获得72株不同交配型蛹虫草菌株(MAT1-1型64株,MAT1-2... 蛹虫草Cordyceps militaris作为冬虫夏草的重要替代品,其交配型(MAT1-1和MAT1-2)对其次级代谢产物的合成具有潜在调控能力,但具体影响尚不明确。本研究通过单孢分离和PCR扩增技术鉴定获得72株不同交配型蛹虫草菌株(MAT1-1型64株,MAT1-2型8株),利用黄豆粉氮源液体发酵体系,系统分析了不同交配型对胞内外多糖、虫草素及腺苷合成的影响。结果表明:(1)交配型显著影响胞外多糖积累,混合接种组(MAT1-1+MAT1-2)的胞外多糖含量(2782.1-3540.4 mg/L)显著高于单菌株培养组(MAT1-1:1977.9-1980.3 mg/L;MAT1-2:1634.2-1935.2 mg/L,P<0.01),协同效应表现明显;(2)虫草素合成主要由MAT1-2菌株驱动,其发酵液虫草素含量(25.1-39.8 mg/L)显著高于MAT1-1菌株(0-0.8 mg/L,P<0.01),且混合接种组未表现协同效应;(3)MAT1-2菌株菌丝体腺苷含量(2268.46-2285.67 mg/kg)显著高于MAT1-1菌株(242.32-304.09 mg/kg,P<0.01),混合接种组腺苷水平介于二者之间,未表现协同效应。本研究揭示了交配型通过调控次级代谢途径影响活性成分合成的潜力,为基于遗传背景的蛹虫草定向发酵工艺优化提供了理论依据。 展开更多
关键词 虫生真菌 交配型MAT1-1 交配型MAT1-2 虫草素 腺苷 胞外多糖
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